Quin és el millor mètode?
—Proves per al diagnòstic de la infecció SARS-CoV-2
Per als casos confirmats de COVID-19, els símptomes clínics comuns reportats inclouen febre, tos, miàlgia o fatiga.No obstant això, aquests símptomes no són característiques úniques de COVID-19 perquè aquests símptomes són similars als d'altres malalties infectades per virus com la grip.Actualment, la PCR en temps real de l'àcid nucleic del virus (rt-PCR), la TC i alguns paràmetres d'hematologia són les eines principals per al diagnòstic clínic de la infecció.Els CDC xinesos han desenvolupat i utilitzat molts kits de proves de laboratori per provar mostres de pacients per a la COVID-191, CDC dels EUA2i altres empreses privades.La prova d'anticossos IgG/IgM, un mètode de prova serològic, també s'ha afegit com a criteri de diagnòstic a la versió actualitzada de la Xina de les directrius de diagnòstic i tractament de la malaltia del nou coronavirus (COVID-19), que es va publicar el 3 de març.1.La prova rt-PCR d'àcid nucleic del virus encara és el mètode de diagnòstic estàndard actual per al diagnòstic de COVID-19.
StrongStep®Novetat Coronavlrus (SARS-COV-2) Kit de PCR en temps real múltiplex (detecció de tres gens)
No obstant això, aquests kits de prova de PCR en temps real, que busquen material genètic del virus, per exemple en hisopos nasals, orals o anals, pateixen moltes limitacions:
1) Aquestes proves tenen temps de resposta llargs i tenen un funcionament complicat;generalment triguen entre 2 i 3 hores de mitjana a generar resultats.
2) Les proves de PCR requereixen laboratoris certificats, equips cars i tècnics formats per funcionar.
3) Hi ha alguns números de falsos negatius per a la rt-PCR de COVID-19.Pot ser que es degui a la baixa càrrega viral del SARS-CoV-2 a l'espècimen d'hisop respiratori superior (el nou coronavirus infecta principalment el tracte respiratori inferior, com els alvèols pulmonars) i la prova no pot identificar les persones que van passar per una infecció, es van recuperar i es van recuperar. van eliminar el virus dels seus cossos.
Investigació de Lirong Zou et al4va trobar que es van detectar càrregues virals més elevades poc després de l'aparició dels símptomes, amb càrregues virals més altes detectades al nas que a la gola i el patró d'eliminació d'àcid nucleic viral dels pacients infectats amb SARS-CoV-2 s'assembla al dels pacients amb grip.4i sembla diferent del que s'observa en pacients infectats amb SARS-CoV-2.
Yang Pan et al5va examinar mostres en sèrie (tampons de gola, esputo, orina i femta) de dos pacients a Pequín i van trobar que les càrregues virals a les mostres d'esput i d'esput van assolir un màxim entre 5 i 6 dies després de l'aparició dels símptomes, les mostres d'esput generalment mostraven càrregues virals més altes que mostres de hisop de gola.No es va detectar ARN viral en mostres d'orina o femta d'aquests dos pacients.
La prova de PCR només dóna un resultat positiu quan el virus encara està present.Les proves no poden identificar les persones que van passar per una infecció, es van recuperar i es van eliminar el virus dels seus cossos.De fet, només entre un 30% i un 50% van ser positius per a la PCR en pacients amb pneumònia per coronavirus diagnosticada clínicament.Molts pacients amb pneumònia per coronavirus no poden ser diagnosticats a causa de la prova d'àcid nucleic negatiu, de manera que no poden rebre el tractament corresponent a temps.Des de la primera fins a la sisena edició de les directrius, basant-se únicament en el diagnòstic dels resultats de les proves d'àcid nucleic, que va causar grans problemes als metges. El primer "denunciant", el doctor Li Wenliang, oftalmòleg de Wuhan Central Hospital, està mort.Durant la seva vida li van fer tres proves d'àcid nucleic en cas de febre i tos, i l'última vegada va obtenir resultats positius per PCR.
Després de la discussió d'experts, es va decidir augmentar els mètodes de prova sèrica com a nou criteri diagnòstic.Mentre que les proves d'anticossos, també anomenades proves serològiques, poden confirmar si algú estava infectat fins i tot després que el seu sistema immunitari hagi eliminat el virus que causa la COVID-19.
Prova ràpida d'anticossos StrongStep® SARS-COV-2 IgG/IgM
La prova d'anticossos IgG/IgM ajudarà a localitzar d'una manera molt més poblacional qui ha tingut la infecció, perquè sembla que molts casos es transmeten de pacients asimptomàtics que no es poden identificar fàcilment.Una parella a Singapur, el marit va donar positiu per PCR, el resultat de la prova PCR de la seva dona va ser negatiu, però els resultats de la prova d'anticossos van mostrar que tenia anticossos, igual que el seu marit.
Els assaigs serològics s'han de validar acuradament per assegurar-se que reaccionen de manera fiable, però només als anticossos contra el nou virus.Una de les preocupacions era que la similitud entre els virus que causen la síndrome respiratòria aguda severa i la COVID-19 podria provocar una reactivitat creuada.La IgG-IgM desenvolupada per Xue Feng wang6es va considerar que es podia utilitzar com a prova al punt de cura (POCT), ja que es pot realitzar a prop del llit amb sang de punxada dels dits.El kit té una sensibilitat del 88,66% i una especificitat del 90,63%.No obstant això, encara hi va haver resultats falsos positius i falsos negatius.
A la versió actualitzada de la Xina de la guia de diagnòstic i tractament de la nova malaltia del coronavirus (COVID-19)1, els casos confirmats es defineixen com els casos sospitosos que compleixen algun dels criteris següents:
(1) Les mostres de vies respiratòries, mostres de sang o femta van resultar positives per a l'àcid nucleic SARS-CoV-2 mitjançant rt-PCR;
(2) La seqüenciació genètica del virus de mostres de tracte respiratori, sang o femta és altament homòloga amb el conegut SARS-CoV-2;
(3) L'anticossos IgM específics del nou coronavirus sèric i els anticossos IgG van ser positius;
(4) L'anticòs sèric IgG específic del coronavirus canviat de negatiu a positiu o l'anticossos IgG específic del coronavirus durant el període de recuperació és 4 vegades més gran que durant el període agut.
Diagnòstic i tractament de la COVID-19
| Pautes | Publicat | Criteris diagnòstics confirmats |
| Versió 7a | 3 de març de 2020 | ❶ PCR ❷ NGS ❸ IgM+IgG |
| Versió 6a | 18 de febrer de 2020 | ❶ PCR ❷ NGS |
Referència
1. Directrius per al diagnòstic i el tractament de la pneumònia per nou coronavirus (versió de prova 7, Comissió Nacional de Salut de la República Popular de la Xina, publicada el 3 de març de 2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. La investigació utilitza només el protocol RT-PCR en temps real per a la identificació de 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Singapur reclama el primer ús de la prova d'anticossos per fer un seguiment de les infeccions per coronavirus
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4. Càrrega viral del SARS-CoV-2 en mostres de les vies respiratòries superiors de pacients infectats 19 de febrer de 2020 DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. Càrregues virals de SARS-CoV-2 en mostres clíniques Lancet Infect Dis 2020 Publicat en línia el 24 de febrer de 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Desenvolupament i aplicació clínica d'una prova ràpida d'anticossos combinats IgM-IgG per SARS-CoV-2
Diagnòstic d'infecció XueFeng Wang ORCID ID: 0000-0001-8854-275X
Hora de publicació: 17-mar-2020
