Un món una lluita
─ Cooperació Internacional per construir una comunitat global de destí comú que respon al repte pandèmic COVID-19
La novel·la Coronavirus que es va arrossegar a tot el món ha donat lloc a una crisi pandèmica Covid-19 global en curs. La novel·la Coronavirus no té fronteres, cap país no serà estalviat des d'aquesta batalla contra Covid-19. En resposta a aquesta pandèmia Covid-19 mundial, Liming Bio-Products Corp aporta aportacions per donar suport al benestar de les nostres comunitats globals.
Actualment, el nostre món s’enfronta a l’impacte sense precedents de la nova malaltia de Coronavirus 2019 (COVID-19). Fins a la data, no hi ha cap medicament eficient per al tractament d’aquesta malaltia. Tot i això, s’han desenvolupat moltes proves de diagnòstic per a la detecció de COVID-19. Aquestes proves es basen en mètodes moleculars o serològics per detectar nous biomarcadors nucleics específics del coronavirus. Com que COVID-19 ha arribat a un estat pandèmic, el diagnòstic precoç de la nova infecció per coronavirus és fonamental per avaluar la propagació del virus i contenir-lo, però encara no existeix una prova perfecta per a ús universal. Hem de saber quines proves es podrien utilitzar per al cribratge, diagnòstic i control de la infecció COVID-19 i quines són les seves limitacions. És molt important com fer un millor ús d’aquestes eines científiques i ajudar a identificar i controlar l’aparició d’aquesta malaltia ràpida i greu.
L’objectiu de la detecció del nou coronavirus és determinar si un individu que té infecció COVID-19 o un portador asimptòtic que pugui estendre el virus en silenci, per proporcionar informació essencial per guiar la presa de decisions per al tractament clínic. Estudis anteriors han demostrat que el 70% de les decisions clíniques depenen dels resultats de la prova. Quan s’utilitzen diferents mètodes de detecció, els requisits dels kits de reactiu de detecció també són diferents.
Figura 1
Figura 1:Diagrama que mostra les etapes clau dels nivells generals de biomarcadors durant el temps de temps típic de la infecció COVID-19. L’eix x indica el nombre de dies d’infecció i l’eix Y indica la càrrega viral, la concentració d’antígens i la concentració d’anticossos en diferents períodes. L’anticòs es refereix a anticossos IgM i IgG. Tant la RT-PCR com la detecció d’antigen s’utilitzen per detectar la presència o l’absència de coronavirus nou, que és una evidència directa per a la detecció precoç del pacient. En una setmana de la infecció viral, es prefereix la detecció de PCR o la detecció d’antigen. Després de la nova infecció per coronavirus durant uns 7 dies, l’anticòs IgM contra el nou coronavirus ha augmentat gradualment a la sang del pacient, però la durada de l’existència és curta i la seva concentració disminueix ràpidament. En canvi, l’anticòs IgG contra el virus apareix més tard, normalment uns 14 dies després de la infecció pel virus. La concentració d’IGG augmenta gradualment i persisteix un llarg període a la sang. Així, si es detecta l’IGM a la sang del pacient, vol dir que el virus s’ha infectat recentment, que és un marcador d’infeccions precoç. Quan l’anticòs IgG es detecta a la sang del pacient, vol dir que la infecció viral ha estat des de fa temps. També s’anomena infecció tardana o infecció anterior. Sovint es veu en pacients que es troben en fase de recuperació.
Els biomarcadors de la novel·la Coronavirus
El nou coronavirus és un virus de l’ARN, que està format per proteïnes i àcids nucleics. El virus envaeix el cos host (humà), entra a les cèl·lules a través del lloc d’unió corresponent al receptor ACE2 i es replica a les cèl·lules hostes, provocant que el sistema immune humà respongui als invasors estrangers i produeixi anticossos específics. Per tant, els àcids i els antígens nucleics de vial i els anticossos específics contra el coronavirus nou es poden utilitzar teòricament com a biomarcadors específics per a la detecció del nou coronavirus. Per a la detecció d’àcids nucleics, la tecnologia RT-PCR s’utilitza més freqüentment, mentre que els mètodes serològics s’utilitzen habitualment per a la detecció dels nous anticossos específics del coronavirus. Actualment, hi ha diversos mètodes de prova disponibles que podem triar per provar la infecció COVID-19 [1].
Principis bàsics dels principals mètodes de prova per a un nou coronavirus
Fins ara hi ha moltes proves de diagnòstic per a COVID_19, amb més kits de prova que reben aprovació sota una autorització d’ús d’emergència cada dia. Tot i que els nous desenvolupaments de proves que es produeixen amb tants noms i formats diferents, totes les proves actuals de COVID_19 es basen bàsicament en dues principals tecnologies: la detecció d’àcids nucleics per a l’ARN viral i els immunoassaigs serològics que detecten anticossos específics virals (IGM i IGG).
01. Detecció d’àcids nucleics
La reacció en cadena de la transcripció inversa-polimerasa (RT-PCR), l'amplificació isotèrmica mediada per bucle (LAMP) i la seqüenciació de nova generació (NGS) són els mètodes comuns d'àcid nucleic per a la detecció de nous ARN coronavirus. RT-PCR és el primer tipus de prova per a COVID-19, recomanat tant per l’Organització Mundial de la Salut (OMS) com pel Centre dels Estats Units per al control i la prevenció de malalties (CDC).
02. Detecció d’anticossos Serològic
L’anticòs és una proteïna protectora produïda en el cos humà en resposta a la infecció pel virus. L’IGM és un tipus d’anticòs primerenc mentre que IgG és un anticòs de tipus posterior. El sèrum o la mostra de plasma se sol examinar per la presència de tipus IgM i IgG específics de l’anticòs per a l’avaluació de fases agudes i convalescents de la infecció COVID-19. Aquests mètodes de detecció basats en anticossos inclouen assaig d’immunocromatografia d’or col·loidal, làtex o immunocromatografia de microsfera fluorescent, assaig immunosorbent vinculat a l’enzim (ELISA) i assaig de quimiiluminescència.
03. Detecció antigen viral
L’antigen és una estructura del virus reconegut pel cos humà que desencadena el sistema de defensa immune per produir anticossos per esborrar el virus de la sang i dels teixits. Es pot orientar i detectar un antigen viral present al virus mitjançant la immunoassaig. Igual que l’ARN viral, els antígens virals també estan presents a les vies respiratòries d’individus infectats i es poden utilitzar per diagnosticar una fase aguda de la infecció COVID-19. Per tant, sovint es recomana recollir exemplars respiratoris superiors com la saliva, la nasofaringe i els tampons orofaringes, l’esput de la tos profund, el líquid de rentat broncoalveolar (BALF) per a les proves d’antigen inicials.
Selecció de mètodes de prova per a un nou coronavirus
La selecció d’un mètode de prova implica molts factors, com ara configuració clínica, control de qualitat de prova, temps de canvi, costos de prova, mètodes de recollida de mostres, requisits tècnics de personal de laboratori, instal·lacions i requisits d’equips. La detecció d’àcids nucleics o antígens virals és proporcionar evidència directa de la presència dels virus i confirmar el diagnòstic d’una nova infecció per coronavirus. Tot i que hi ha molts mètodes per a la detecció d’antigen, la seva sensibilitat de detecció del nou coronavirus és teòricament inferior a la de l’amplificació RT-PCR. La prova d’anticossos és la detecció d’anticossos anti-virus produïts al cos humà, que es queda en el temps i sovint no es pot utilitzar per a la detecció precoç durant la fase aguda de la infecció per virus. La configuració clínica de les aplicacions de detecció pot variar i els llocs de recollida de mostres també poden ser diferents. Per a la detecció d’àcids nucleics virals i antígens, s’ha de recollir l’exemplar a les vies respiratòries on hi ha el virus, com ara swabs nasofaringes, swabs orofaringees, esput o fluid de rentat broncoalveolar (BALF). Per a la detecció basada en anticossos, cal recollir i examinar l'exemplar de sang per a la presència d'anticossos anti-virus específics (IgM/IgG). Tot i això, els resultats de les proves d’anticossos i d’àcid nucleic poden complementar -se mútuament. Per exemple, quan el resultat de la prova és l’àcid nucleic negatiu, negatiu IgM, però positiu IgG, aquests resultats indiquen que el pacient no porta actualment el virus, sinó que s’ha recuperat de la nova infecció per coronavirus. [2]
Avantatges i desavantatges de les noves proves de coronavirus
En el protocol de diagnòstic i tractament per a una nova pneumònia coronavirus (Versió de la prova 7) (publicat per la National Health Commission i l’Administració de l’estat de la medicina tradicional xinesa el 3 de març de 2020), les proves d’àcid nucleic s’utilitzen com a mètode estàndard d’or per al diagnòstic de la novel·la Infecció per coronavirus, mentre que la prova d’anticossos també es considera un dels mètodes de confirmació del diagnòstic.
Troballes patogèniques i serològiques
(1) Conclusions patògens: Nou àcid nucleic de coronavirus es pot detectar en tampons nasofaríngics, esput, secrecions de les vies respiratòries inferiors, sang, femtes i altres exemplars mitjançant mètodes RT-Pcrand/o NGS. És més precís si s’obtenen exemplars a partir de les vies respiratòries inferiors (extracció d’esput o de les vies d’aire). Els exemplars s’han d’enviar per fer proves el més aviat possible després de la recollida.
(2) Conclusions serològiques: IgM específic del virus NCP es fa detectable al voltant dels 3-5 dies després de l'aparició; IgG assoleix una titulació d'almenys 4 vegades durant la convalescència en comparació amb la fase aguda.
Tanmateix, la selecció de mètodes de prova depèn de les ubicacions geogràfiques, les regulacions mèdiques i els entorns clínics. Als EUA, la NIH va emetre les directrius de tractament del Coronavirus 2019 (COVID-19) (lloc actualitzat: 21 d’abril de 2020) i la Política emesa de la FDA per a proves de diagnòstic per a la malaltia del coronavirus-2019 durant l’emergència de salut pública (emesa el 16 de març de 2020 ), en què les proves serològiques dels anticossos IgM/IgG només es van seleccionar com a prova de cribratge.
Mètode de detecció d’àcids nucleics
RT_PCR és una prova d’àcid nucleic altament sensible dissenyat per detectar si el nou ARN coronavirus està present o no en el exemplar respiratori o en un altre exemplar. Un resultat positiu de la prova de PCR significa la presència de New Coronavirus ARN a la mostra per confirmar la infecció COVID-19. Un resultat negatiu de la prova de PCR no significa l’absència de la infecció pel virus perquè es podria veure afectada per una mala qualitat de la mostra o el punt de temps de la malaltia a la fase recuperada, etc. Tot i que RT-PCR és una prova altament sensible, té diversos inconvenients. Les proves RT-PCR poden ser intensives en mà d’obra i consumeixen temps, depenent crucialment de l’alta qualitat de la mostra. Això pot ser un repte perquè la quantitat d’ARN viral no només varia enormement entre diferents pacients, sinó que també pot variar dins del mateix pacient segons els punts de temps en què es recull la mostra, així com les fases de la infecció o l’aparició dels símptomes clínics. La detecció del nou coronavirus requereix exemplars d’alta qualitat que contenen una quantitat suficient d’ARN viral intacte.
La prova RT-PCR pot donar un resultat negatiu incorrecte (fals negatiu) per a alguns pacients que tenen infecció COVID-19. Com sabem, els principals llocs d’infecció del nou coronavirus es troben al pulmó i a les vies respiratòries inferiors, com els alvèols i els bronquis. Per tant, la mostra d’esput d’una tos profunda o el fluid de rentat broncoalveolar (BALF) es considera que té la sensibilitat més alta per a la detecció viral. No obstant això, en la pràctica clínica, les mostres sovint es recullen de les vies respiratòries superiors mitjançant els subs nasofaringe o orofaríngics. Recollir aquests exemplars no només és incòmode per als pacients, sinó que també requereix personal especialment format. Per fer el mostreig menys invasiu o fàcil, en alguns casos els pacients poden rebre un tampó oral i deixar -los prendre una mostra de la mucosa bucal o la llengua que es desplaça. Sense ARN viral suficient, RT-qPCR pot retornar un resultat de prova fals-negatiu. A la província de Hubei, la Xina, la sensibilitat RT-PCR en la detecció inicial només es va informar al voltant del 30%-50%, amb una mitjana del 40%. L’elevada taxa de fals-negatiu va ser probablement causada per mostreig insuficient.
A més, la prova RT-PCR requereix que un personal altament format per realitzar passos complexos d’extracció d’ARN i procediment d’amplificació de PCR. També requereix un nivell més alt de protecció de bioseguretat, instal·lacions especials de laboratori i instrument de PCR en temps real. A la Xina, la prova RT-PCR per a la detecció de COVID-19 s’ha de realitzar en laboratoris de nivell 2 de bioseguretat (BSL-2), amb protecció del personal mitjançant la pràctica de Biosegufety Nivell 3 (BSL-3). Sota aquests requisits, des de principis de gener fins a principis de febrer de 2020, la capacitat del laboratori CDC de la Xina Wuhan només va poder detectar uns quants centenars de casos al dia. Normalment, això no seria un problema a l’hora de provar altres malalties infeccioses. Tanmateix, quan es tracta d’una pandèmia global com COVID-19 amb possibles milions de persones a provar, RT-PCR es converteix en un problema crític a causa dels seus requisits per a instal·lacions especials de laboratori o equips tècnics. Aquests desavantatges poden limitar la RT-PCR a utilitzar-se com a eina eficient per al cribratge i també pot comportar retards en els informes dels resultats de la prova.
Mètode de detecció d’anticossos serològics
Amb el progrés del curs de la malaltia, especialment en les etapes mitjanes i tardanes, la taxa de detecció d’anticossos és molt alta. Un estudi a l’Hospital Central del Sud de Wuhan va demostrar que la taxa de detecció d’anticossos podria arribar a més del 90% a la tercera setmana de la infecció COVID-19. A més, l’anticòs és el producte de la resposta immune humana contra el nou coronavirus. La prova d’anticossos ofereix diversos avantatges respecte a RT-PCR. En primer lloc, l’anticòs serològic proves senzill i ràpid. Les proves de flux lateral d’anticossos es poden utilitzar per a l’atenció per obtenir un resultat en 15 minuts. En segon lloc, l’objectiu detectat per la prova serològica és l’anticòs, que se sap que és molt més estable que l’ARN viral. Durant la recollida, el transport, l’emmagatzematge i les proves, els exemplars per a proves d’anticossos són generalment més estables que els exemplars de RT-PCR. En tercer lloc, com que l’anticòs es distribueix uniformement en la circulació sanguínia, hi ha menys variació de mostreig en comparació amb la prova d’àcid nucleic. El volum de mostra necessari per a la prova d’anticossos és relativament reduït. Per exemple, 10 microlitres de sang de dits són suficients per utilitzar-los en la prova de flux lateral dels anticossos.
En general, la prova d’anticossos s’escull com a eina de suplement per a la detecció d’àcids nucleics per millorar la taxa de detecció del nou coronavirus durant els cursos de la malaltia. Quan s’utilitza la prova d’anticossos juntament amb una prova d’àcid nucleic, pot augmentar la precisió del test per al diagnòstic de COVID19 reduint els resultats falsos i falsos-negatius. La guia de funcionament actual no recomana utilitzar dos tipus de prova per separat com a format de detecció independent, però s’ha d’utilitzar com a format combinat. [2]
Figura 2:La correcta interpretació de l’àcid nucleic i els proves d’anticossos per a la detecció d’una nova infecció per coronavirus
Figura 3:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Noveta®Test ràpid d’anticossos SARS-CoV-2 IgM/IgG, immunocromatografia de làtex)
Figura 4:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Strongstep®Novetat Coronavirus (SARS-CoV-2) múltiple kit de PCR en temps real (detecció per a tres gens, mètode de sonda fluorescent).
NOTA:Aquest kit PCR altament sensible i preparat per utilitzar està disponible en format liofilitzat (procés d’assecat congelat) per a l’emmagatzematge a llarg termini. El kit es pot transportar i guardar a temperatura ambient i és estable durant un any. Cada tub de premix conté tots els reactius necessaris per a l'amplificació de PCR, incloent-hi la transcriptasa inversa, la polimerasa TAQ, els primers, les sondes i els substrats DNTP en un instrument PCR per executar l'amplificació.
En resposta al nou brot de coronavirus, Liming Bio-Products Co., Ltd. ha treballat ràpidament per desenvolupar dos kits de diagnòstic per permetre als laboratoris clínics i de salut pública diagnosticar ràpidament la infecció COVID-19. Aquests kits són molt adequats per utilitzar-los per al cribratge a gran escala en països i regions on el nou brot de coronavirus es propaga ràpidament i per proporcionar diagnòstic i confirmació per a la infecció COVID-19. Aquests kits només s’utilitzen sota l’autorització d’ús d’emergència pre-notificada (PEUA). Les proves es limiten als laboratoris certificats segons la normativa de les autoritats nacionals o locals.
Mètode de detecció d’antigen
1. La detecció d’antigen viral es classifica en la mateixa categoria de detecció directa que la detecció d’àcids nucleics. Aquests mètodes de detecció directa busquen evidències de patògens virals a la mostra i es poden utilitzar per al diagnòstic de confirmació. No obstant això, el desenvolupament de kits de detecció d’antigen requereix una alta qualitat dels anticossos monoclonals amb una forta afinitat i alta sensibilitat capaços de reconèixer i capturar virus patògens. Normalment es triga més de sis mesos a seleccionar i optimitzar un anticòs monoclonal adequat per utilitzar -lo en la preparació del kit de detecció d’antigen.
2. Actualment, els reactius per a la detecció directa del nou coronavirus encara estan en fase de recerca i desenvolupament. Per tant, cap kit de detecció d’antigen s’ha validat clínicament i disponible comercialment. Tot i que anteriorment es va informar que una empresa de diagnòstic a Shenzhen ha desenvolupat un kit de detecció d’antigen i es va provar clínicament a Espanya, la fiabilitat i la precisió del test no es podrien validar a causa de la presència de problemes de qualitat de reactiu. Fins a la data, NMPA (ex -FDA de la Xina) encara no ha aprovat cap kit de detecció d’antigen per a ús clínic. En conclusió, s’han desenvolupat diversos mètodes de detecció. Cada mètode té els seus avantatges i limitacions. Els resultats de diferents mètodes es poden utilitzar per a la verificació i el complement.
3. Produir un kit de proves COVID-19 de qualitat depèn fortament de l’optimització durant la investigació i el desenvolupament. Liming Bio-Product Co., Ltd. Els kits de prova són necessaris per complir els estàndards de fabricació i control de qualitat estrictes per assegurar -se que proporcionen els nivells més alts de rendiment i coherència. Els científics de Liming Bio-Product Co., Ltd. tenen més de vint anys d’experiència en el disseny, les proves i l’optimització de kits de diagnòstic in vitro per assegurar el màxim nivell de rendiment en la quantificació analítica.
Durant la pandèmia COVID-19, el govern xinès es va enfrontar a la gran demanda de materials de prevenció epidèmica als punts d'interès internacionals. El 5 d'abril, a la conferència de premsa del mecanisme de prevenció i control conjunt del Consell Estatal "Enfortir la gestió de la qualitat dels materials mèdics i regular l'ordre del mercat", Jiang Fan, un inspector de primer nivell del departament de comerç exterior del ministeri De comerç, va dir: "A continuació, centrarem els nostres esforços en dos aspectes, en primer lloc, per accelerar el suport de més subministraments mèdics necessaris per la comunitat internacional i, també, per millorar el control de qualitat, la regulació i la gestió dels productes. Farem la contribució de la Xina a respondre conjuntament a l’epidèmia global i a construir una comunitat amb un futur compartit per a la humanitat.
Figura 5:Liming Bio-Products Co., La novel·la Coronavirus Reactent ha obtingut el certificat de registre de la UE CE
El certificat honorari
Houshenshan
Figura 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. va donar suport a Wuhan Vulcan (Houshenshan) Hospital de muntanya per lluitar contra l'epidèmia COVID-19 i va ser guardonat amb el certificat honorari de la Creu Roja de Wuhan. L’Hospital Wuhan Vulcan Mountain és l’hospital més famós de la Xina especialitzat en el tractament de 19 pacients greus.
A mesura que el brot de Coronavirus continua estenent-se per tot el món, Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd., s’estén per donar suport i ajudar les comunitats a tot el món amb les nostres tecnologies innovadores per combatre aquesta amenaça global sense precedents. Les proves ràpides de la infecció COVID-19 són una part crítica per afrontar aquesta amenaça. Continuem contribuint de manera important proporcionant plataformes de diagnòstic d’alta qualitat en mans dels treballadors sanitaris de primera línia perquè les persones puguin rebre els resultats crítics de les proves que necessiten. Els esforços de Liming Bio-Products Co., Ltd. en la batalla contra la pandèmia de Covid-19 són aportar les nostres tecnologies, experiències i experiència a les comunitats internacionals per a la construcció d’una comunitat global de destins.
Premsa llarga ~ escanejar -nos i seguir -nos
Correu electrònic: sales@limingbio.com
Lloc web: https://limingbio.com
Hora de la publicació: 01-2010 de maig
