Un món, una lluita
─Cooperació internacional per construir una comunitat global de destí comú responent al repte de la pandèmia de la COVID-19
El nou coronavirus que ha arrasat arreu del món ha donat lloc a una crisi pandèmica global de COVID-19.El nou coronavirus no té fronteres, cap país s'estalviarà d'aquesta batalla contra la COVID-19.En resposta a aquesta pandèmia mundial de COVID-19, Liming Bio-Products Corp està fent contribucions per donar suport al benestar de les nostres comunitats globals.
El nostre món s'enfronta actualment a l'impacte sense precedents de la pandèmia de la nova malaltia coronavirus 2019 (COVID-19).Fins ara, no hi ha cap fàrmac eficaç disponible per al tractament d'aquesta malaltia.Tanmateix, s'han desenvolupat moltes proves de diagnòstic per a la detecció de COVID-19.Aquestes proves es basen en mètodes moleculars o serològics per detectar els biomarcadors d'anticossos o àcids nucleics específics del nou coronavirus.Com que COVID-19 ha arribat a un estat de pandèmia, el diagnòstic precoç de la nova infecció per coronavirus és fonamental per avaluar la propagació del virus i contenir-lo, però encara no existeix una prova perfecta per a l'ús universal.Hem de saber quines proves podrien utilitzar-se per a la detecció, el diagnòstic i el seguiment de la infecció per COVID-19, i quines són les seves limitacions.És molt important com fer un millor ús d'aquestes eines científiques i ajudar a identificar i controlar l'aparició d'aquesta malaltia greu i de ràpida propagació.
L'objectiu de la detecció del nou coronavirus és determinar si un individu que té una infecció per COVID-19 o un portador asimptòtic que pot propagar el virus en silenci, per proporcionar informació essencial per guiar la presa de decisions per al tractament clínic.Estudis anteriors han demostrat que el 70% de les decisions clíniques depenen dels resultats de les proves.Quan s'utilitzen mètodes de detecció diferents, els requisits dels kits de reactius de detecció també són diferents.
figura 1
Figura 1:Diagrama que mostra les etapes clau dels nivells generals de biomarcadors durant el curs típic de la infecció per COVID-19.L'eix X indica el nombre de dies d'infecció, i l'eix Y indica la càrrega viral, la concentració d'antígens i la concentració d'anticossos en diferents períodes.L'anticossos fa referència als anticossos IgM i IgG.Tant la RT-PCR com la detecció d'antígens s'utilitzen per detectar la presència o l'absència del nou coronavirus, que és una evidència directa per a la detecció precoç del pacient.Dins d'una setmana de la infecció viral, es prefereix la detecció per PCR o la detecció d'antigen.Després de la infecció pel nou coronavirus durant uns 7 dies, l'anticòs IgM contra el nou coronavirus ha augmentat gradualment a la sang del pacient, però la durada de l'existència és curta i la seva concentració disminueix ràpidament.En canvi, l'anticossos IgG contra el virus apareix més tard, normalment uns 14 dies després de la infecció pel virus.La concentració d'IgG augmenta gradualment i persisteix un llarg període a la sang.Així, si es detecta la IgM a la sang del pacient, vol dir que el virus s'ha infectat recentment, la qual cosa és un marcador precoç d'infecció.Quan es detecta l'anticossos IgG a la sang del pacient, vol dir que la infecció vírica ja fa temps.També s'anomena infecció tardana o infecció prèvia.Sovint es veu en pacients que es troben en fase de recuperació.
Els biomarcadors del nou coronavirus
El nou coronavirus és un virus d'ARN, que es compon de proteïnes i àcids nucleics.El virus envaeix el cos hoste (humà), entra a les cèl·lules a través del receptor ACE2 corresponent al lloc d'unió i es replica a les cèl·lules hoste, fent que el sistema immunitari humà respongui als invasors estrangers i produeixi anticossos específics.Per tant, els àcids nucleics i els antígens del vial i els anticossos específics contra el nou coronavirus es poden utilitzar teòricament com a biomarcadors específics per a la detecció del nou coronavirus.Per a la detecció d'àcids nucleics, la tecnologia RT-PCR és la més utilitzada, mentre que els mètodes serològics s'utilitzen habitualment per a la detecció dels nous anticossos específics del coronavirus.Actualment, hi ha una varietat de mètodes de prova disponibles que podem triar per provar la infecció per COVID-19 [1].
Principis bàsics dels principals mètodes de prova per al nou coronavirus
Fins ara hi ha moltes proves de diagnòstic per a COVID_19 disponibles, amb més kits de proves que reben l'aprovació d'una autorització d'ús d'emergència cada dia.Tot i que els nous desenvolupaments de proves surten amb tants noms i formats diferents, totes les proves actuals de COVID_19 es basen bàsicament en dues tecnologies principals: la detecció d'àcids nucleics per a l'ARN viral i els immunoassaigs serològics que detecten anticossos específics de virus (IgM i IgG).
01. Detecció d'àcids nucleics
La reacció en cadena de la transcripció inversa-polimerasa (RT-PCR), l'amplificació isotèrmica mediada per bucle (LAMP) i la seqüenciació de nova generació (NGS) són els mètodes d'àcid nucleic habituals per a la detecció de nou ARN de coronavirus.La RT-PCR és el primer tipus de prova per a la COVID-19, recomanada tant per l'Organització Mundial de la Salut (OMS) com pel Centre per al Control i la Prevenció de Malalties (CDC) dels EUA.
02.Detecció serològica d'anticossos
L'anticossos és una proteïna protectora produïda al cos humà en resposta a la infecció del virus.La IgM és un tipus d'anticossos primerenc, mentre que la IgG és un anticòs de tipus posterior.Normalment, la mostra de sèrum o plasma s'examina per detectar la presència de tipus específics d'IgM i IgG de l'anticossos per a l'avaluació de les fases agudes i convalescents de la infecció per COVID-19.Aquests mètodes de detecció basats en anticossos inclouen assaig d'immunocromatografia d'or col·loïdal, immunocromatografia de làtex o microesfera fluorescent, assaig d'immunosorbent lligat a enzims (ELISA) i assaig de quimioluminescència.
03.Detecció d'antigen viral
L'antigen és una estructura del virus reconeguda pel cos humà que activa el sistema de defensa immune per produir anticossos per netejar el virus de la sang i els teixits.Un antigen víric present al virus es pot adreçar i detectar mitjançant immunoassaig.Igual que l'ARN viral, els antígens virals també estan presents al tracte respiratori dels individus infectats i es poden utilitzar per diagnosticar la fase aguda de la infecció per COVID-19.Per tant, sovint es recomana recollir mostres de les vies respiratòries superiors, com ara saliva, hisops nasofaríngies i orofaríngies, esputo de tos profunda, líquid de rentat broncoalveolar (BALF) per a la prova inicial d'antigen.
Selecció de mètodes de prova per al nou coronavirus
La selecció d'un mètode de prova implica molts factors, com ara l'entorn clínic, el control de qualitat de les proves, el temps de resposta, els costos de les proves, els mètodes de recollida de mostres, els requisits tècnics del personal del laboratori, els requisits de les instal·lacions i els equips.La detecció d'àcids nucleics o antígens virals consisteix a proporcionar proves directes de la presència dels virus i confirmar el diagnòstic de la nova infecció per coronavirus.Tot i que hi ha molts mètodes per a la detecció d'antigen, la seva sensibilitat de detecció del nou coronavirus és teòricament inferior a la de l'amplificació RT-PCR.Les proves d'anticossos són la detecció d'anticossos antivirus produïts al cos humà, que es retarden en el temps i sovint no es poden utilitzar per a la detecció precoç durant la fase aguda de la infecció viral.La configuració clínica de les aplicacions de detecció pot variar i els llocs de recollida de mostres també poden ser diferents.Per a la detecció d'àcids nucleics i antígens virals, l'exemplar s'ha de recollir a les vies respiratòries on hi ha el virus, com ara hisops nasofaríngs, hisops orofaríngs, esputo o líquid de rentat broncoalveolar (BALF).Per a la detecció basada en anticossos, cal recollir mostres de sang i examinar-les per detectar la presència d'anticossos antivirus específics (IgM/IgG).Tanmateix, els resultats de les proves d'anticossos i àcids nucleics es poden complementar.Per exemple, quan el resultat de la prova és l'àcid nucleic negatiu, IgM negatiu però IgG positiu, aquests resultats indiquen que el pacient actualment no porta el virus, però s'ha recuperat de la nova infecció per coronavirus.[2]
Avantatges i desavantatges de les noves proves de coronavirus
Al Protocol de diagnòstic i tractament de la pneumònia del nou coronavirus (versió d'assaig 7) (publicat per la Comissió Nacional de Salut i l'Administració Estatal de Medicina Tradicional Xinesa el 3 de març de 2020), les proves d'àcid nucleic s'utilitzen com a mètode estàndard d'or per al diagnòstic de la novel·la. infecció per coronavirus, mentre que la prova d'anticossos també es considera un dels mètodes de confirmació per al diagnòstic.
Trobades patògenes i serològiques
(1) Trobades patògenes: el nou àcid nucleic del coronavirus es pot detectar en hisops nasofaríngs, esputo, secrecions de les vies respiratòries inferiors, sang, femta i altres mostres mitjançant mètodes RT-PCR i/o NGS.És més precís si s'obtenen mostres de les vies respiratòries inferiors (extracció d'esput o d'aire).Les mostres s'han de presentar per a la prova tan aviat com sigui possible després de la recollida.
(2) Descobertes serològiques: la IgM específica del virus NCP es pot detectar al voltant de 3-5 dies després de l'inici;La IgG arriba a una valoració d'almenys 4 vegades durant la convalescència en comparació amb la fase aguda.
Tanmateix, la selecció dels mètodes de prova depèn de les ubicacions geogràfiques, les regulacions mèdiques i la configuració clínica.Als EUA, el NIH va emetre Directrius de tractament de la malaltia del coronavirus 2019 (COVID-19) (lloc actualitzat: 21 d'abril de 2020) i la FDA va emetre la Política de proves de diagnòstic per a la malaltia del coronavirus-2019 durant l'emergència de salut pública (publicada el 16 de març de 2020). ), en què les proves serològiques dels anticossos IgM/IgG seleccionats només com a prova de cribratge.
Mètode de detecció d'àcids nucleics
RT_PCR és una prova d'àcid nucleic altament sensible dissenyada per detectar si el nou ARN del coronavirus està present o no a la mostra respiratòria o d'un altre tipus.Un resultat positiu de la prova de PCR significa la presència de nou ARN de coronavirus a la mostra per confirmar la infecció per COVID-19.Un resultat negatiu de la prova de PCR no significa l'absència de la infecció pel virus perquè podria veure's afectat per la mala qualitat de la mostra o el punt de temps de la malaltia en la fase de recuperació, etc.Tot i que la RT-PCR és una prova molt sensible, té diversos inconvenients.Les proves RT-PCR poden ser laborioses i llargues, depenent de manera crucial de l'alta qualitat de la mostra.Això pot ser un repte perquè la quantitat d'ARN viral no només varia enormement entre diferents pacients, sinó que també pot variar dins d'un mateix pacient segons els moments en què es recull la mostra, així com les fases d'infecció o l'aparició dels símptomes clínics.La detecció del nou coronavirus requereix mostres d'alta qualitat que continguin una quantitat suficient d'ARN viral intacte.
La prova RT-PCR pot donar un resultat negatiu incorrecte (fals negatiu) per a alguns pacients que tenen infecció per COVID-19.Com sabem, els principals llocs d'infecció del nou coronavirus es troben al pulmó i a les vies respiratòries inferiors, com els alvèols i els bronquis.Per tant, l'exemplar d'esput d'una tos profunda o el líquid de rentat broncoalveolar (BALF) es considera que té la sensibilitat més alta per a la detecció viral.No obstant això, a la pràctica clínica, sovint es recullen mostres de les vies respiratòries superiors mitjançant l'ús d'hisops nasofaríngies o orofaríngies.La recollida d'aquests exemplars no només és incòmode per als pacients, sinó que també requereix personal especialment format.Per fer que la presa de mostres sigui menys invasiva o més fàcil, en alguns casos es pot donar als pacients un hisop bucal i permetre'ls prendre una mostra de la mucosa bucal o de la llengua fent-los ells mateixos.Sense suficient ARN viral, la RT-qPCR pot tornar un resultat de la prova fals negatiu.A la província de Hubei, Xina, la sensibilitat RT-PCR en la detecció inicial només es va informar d'un 30%-50%, amb una mitjana del 40%.L'alta taxa de falsos negatius probablement va ser causada per un mostreig insuficient.
A més, la prova RT-PCR requereix personal altament format per dur a terme passos complexos d'extracció d'ARN i procediment d'amplificació per PCR.També requereix un nivell més alt de protecció de bioseguretat, instal·lacions especials de laboratori i instrument de PCR en temps real.A la Xina, la prova RT-PCR per a la detecció de COVID-19 s'ha de realitzar en laboratoris de nivell de bioseguretat 2 (BSL-2), amb protecció del personal mitjançant la pràctica de nivell de bioseguretat 3 (BSL-3).Sota aquests requisits, des de principis de gener fins a principis de febrer de 2020, la capacitat del laboratori CDC de Xina Wuhan només va poder detectar uns quants centenars de casos per dia.Normalment, això no seria un problema a l'hora de provar altres malalties infeccioses.Tanmateix, quan es tracta d'una pandèmia global com la COVID-19 amb potencialment milions de persones a provar, la RT-PCR es converteix en un problema crític a causa dels seus requisits per a instal·lacions especials de laboratori o equipament tècnic.Aquests inconvenients poden limitar l'ús de la RT-PCR com a eina eficient per al cribratge i també poden provocar retards en els informes dels resultats de les proves.
Mètode serològic de detecció d'anticossos
Amb el progrés del curs de la malaltia, especialment a les etapes mitjanes i últimes, la taxa de detecció d'anticossos és molt alta.Un estudi a l'Hospital Central South de Wuhan va demostrar que la taxa de detecció d'anticossos podria arribar a més del 90% en la tercera setmana d'infecció per COVID-19.A més, l'anticossos és el producte de la resposta immune humana contra el nou coronavirus.La prova d'anticossos ofereix diversos avantatges respecte a la RT-PCR.En primer lloc, les proves serològiques d'anticossos són senzilles i ràpides.Les proves de flux lateral d'anticossos es poden utilitzar per al punt d'atenció per obtenir un resultat en 15 minuts.En segon lloc, la diana detectada per la prova serològica és l'anticossos, que se sap que és molt més estable que l'ARN viral.Durant la recollida, el transport, l'emmagatzematge i les proves, les mostres per a proves d'anticossos són generalment més estables que les mostres per a RT-PCR.En tercer lloc, com que l'anticossos es distribueix uniformement a la circulació sanguínia, hi ha menys variació de mostreig en comparació amb la prova d'àcid nucleic.El volum de mostra necessari per a la prova d'anticossos és relativament petit.Per exemple, 10 microlitres de sang de punxada als dits són suficients per utilitzar-los en la prova de flux lateral d'anticossos.
En general, la prova d'anticossos s'escull com a eina suplementària per a la detecció d'àcids nucleics per millorar la taxa de detecció del nou coronavirus durant els cursos de la malaltia.Quan la prova d'anticossos s'utilitza juntament amb una prova d'àcid nucleic, pot augmentar la precisió de l'assaig per al diagnòstic de COVID19 reduint els possibles resultats falsos positius i falsos negatius.La guia d'operacions actual no recomana utilitzar dos tipus de prova per separat com a format de detecció independent, però s'hauria d'utilitzar com a format combinat.[2]
Figura 2:La correcta interpretació dels resultats de les proves d'àcid nucleic i anticossos per a la detecció de la nova infecció per coronavirus
Figura 3:Liming Bio-Products Co., Ltd. - Kit de prova ràpida dual d'anticossos IgM/IgG nou coronavirus (StrongStep®Prova ràpida d'anticossos IgM/IgG SARS-CoV-2, immunocromatografia de làtex)
Figura 4:Liming Bio-Products Co., Ltd. - StrongStep®Kit de PCR en temps real multiplexat del nou coronavirus (SARS-CoV-2) (detecció de tres gens, mètode de sonda fluorescent).
Nota:Aquest kit de PCR altament sensible i llest per utilitzar està disponible en format liofilitzat (procés de liofilització) per a l'emmagatzematge a llarg termini.El kit es pot transportar i emmagatzemar a temperatura ambient i és estable durant un any.Cada tub de premescla conté tots els reactius necessaris per a l'amplificació per PCR, incloent-hi la transcriptasa inversa, la polimerasa Taq, els primers, les sondes i els substrats dNTPs. Els usuaris simplement poden reconstituir la barreja afegint aigua de grau PCR juntament amb la plantilla i després carregar-los. en un instrument de PCR per executar l'amplificació.
En resposta al nou brot de coronavirus, Liming Bio-Products Co., Ltd. ha treballat ràpidament per desenvolupar dos kits de diagnòstic per permetre als laboratoris clínics i de salut pública diagnosticar ràpidament la infecció per COVID-19.Aquests kits són molt adequats per al cribratge a gran escala en països i regions on el nou brot de coronavirus s'està estenent ràpidament i per proporcionar diagnòstic i confirmació de la infecció per COVID-19.Aquests kits només es poden utilitzar sota l'Autorització d'ús d'emergència notificada prèviament (PEUA).Les proves es limiten als laboratoris certificats segons les normatives de les autoritats nacionals o locals.
Mètode de detecció d'antígens
1. La detecció d'antigen viral es classifica en la mateixa categoria de detecció directa que la detecció d'àcids nucleics.Aquests mètodes de detecció directa busquen proves de patògens virals a la mostra i es poden utilitzar per a la confirmació del diagnòstic.No obstant això, el desenvolupament de kits de detecció d'antígens requereix anticossos monoclonals d'alta qualitat amb forta afinitat i alta sensibilitat capaços de reconèixer i capturar virus patògens.Normalment triguen més de sis mesos seleccionar i optimitzar un anticòs monoclonal adequat per al seu ús en la preparació del kit de detecció d'antígens.
2. Actualment, els reactius per a la detecció directa del nou coronavirus encara es troben en fase d'investigació i desenvolupament.Per tant, cap kit de detecció d'antígens s'ha validat clínicament i disponible comercialment.Tot i que s'havia informat anteriorment que una empresa de diagnòstic de Shenzhen ha desenvolupat un kit de detecció d'antígens i s'ha provat clínicament a Espanya, la fiabilitat i precisió de l'assaig no s'han pogut validar a causa de la presència de problemes de qualitat dels reactius.Fins ara, NMPA (antiga FDA de la Xina) encara no ha aprovat cap kit de detecció d'antígens per a ús clínic.En conclusió, s'han desenvolupat diversos mètodes de detecció.Cada mètode té els seus avantatges i limitacions.Els resultats de diferents mètodes es poden utilitzar per a la verificació i el complement.
3. La producció d'un kit de proves COVID-19 de qualitat depèn en gran mesura de l'optimització durant la investigació i el desenvolupament.Liming Bio-Product Co., Ltd.Els kits de prova han de complir estrictes estàndards de fabricació i control de qualitat per garantir que proporcionin els nivells més alts de rendiment i consistència.Els científics de Liming Bio-Product Co., Ltd. tenen més de vint anys d'experiència en el disseny, prova i optimització de kits de diagnòstic in vitro per garantir el màxim nivell de rendiment en quantificació analítica.
Durant la pandèmia de la COVID-19, el govern xinès es va enfrontar a l'augment de la gran demanda de materials de prevenció d'epidèmies als punts calents internacionals.El 5 d'abril, a la conferència de premsa del Mecanisme Conjunt de Prevenció i Control del Consell d'Estat "Enfortir la gestió de la qualitat dels materials mèdics i regular l'ordre del mercat", Jiang Fan, inspector de primer nivell del Departament de Comerç Exterior del Ministeri. de Comerç, va dir: "A continuació, centrarem els nostres esforços en dos aspectes, primer, per accelerar el suport de més subministraments mèdics necessaris per la comunitat internacional, i també, per millorar el control de qualitat, la regulació i la gestió dels productes. Farem la contribució de la Xina per respondre conjuntament a l'epidèmia mundial i construir una comunitat amb un futur compartit per a la humanitat.
Figura 5:El nou reactiu de coronavirus de Liming Bio-Products Co., Ltd. ha obtingut el certificat de registre CE de la UE
El certificat honorífic
Houshenshan
Figura 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. va donar suport a l'hospital de muntanya de Wuhan Vulcan (HouShenShan) per lluitar contra l'epidèmia de COVID-19 i va rebre el certificat honorífic de la Creu Roja de Wuhan.L'hospital de muntanya de Wuhan Vulcan és l'hospital més famós de la Xina especialitzat en el tractament de pacients greus amb COVID-19.
A mesura que el nou brot de coronavirus continua estenent-se per tot el món, Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. està augmentant per donar suport i ajudar les comunitats de tot el món amb les nostres tecnologies innovadores per combatre aquesta amenaça global sense precedents.Les proves ràpides de la infecció per COVID-19 són una part fonamental per fer front a aquesta amenaça.Continuem contribuint de manera significativa proporcionant plataformes de diagnòstic d'alta qualitat en mans dels treballadors sanitaris de primera línia perquè la gent pugui rebre els resultats de les proves crítiques que necessiten.Els esforços de Liming Bio-products Co., Ltd. en la batalla contra la pandèmia de COVID-19 són aportar les nostres tecnologies, experiències i coneixements a les comunitats internacionals per a la construcció d'una comunitat global de destí.
Premeu llargament~Escaneja i segueix-nos
Correu electrònic: sales@limingbio.com
Lloc web: https://limingbio.com
Hora de publicació: 01-maig-2020
